饮料微生物学实时聚合酶链反应

味道难闻,浑浊,甚至会爆炸的瓶子:在过去的几年里,酵母美国diastaticus给几家精酿啤酒商带来了麻烦。在啤酒变质前检测污染并不容易。

酿酒酵母var。锯膜(或美国diastaticus简称)是一种常见的上发酵啤酒酵母酿酒酵母.该酵母品种具有STA基因,可以产生和表达细胞外糖化酶。外源性糖淀粉酶可能导致二次发酵,甚至在包装瓶,罐或桶,这种过度衰减可能导致容器的损坏。召回将是代价高昂的后果。

到目前为止,这些案例主要局限于美国的精酿啤酒酿造商,但与此同时,欧洲的啤酒酿造商也遭受了这种麻烦的经历——而且这个问题可能出现在全世界。最近,瑞典对一种模糊的印度淡啤的召回登上了欧洲媒体的头条,并警告说“瓶子会爆炸”(即使在这个案例中没有公布是否会爆炸)S. DiaSticus.是原因)。到目前为止,美国diastaticus在几家公司的几家商业酵母中被发现,主要在比利时赛迪斯风格啤酒的酵母中。有些啤酒厂故意使用它具有更高的衰减的特殊质朴的啤酒 - 因此较高的二氧化碳压力。然而,啤酒厂似乎没有积极地酝酿这么质时髦的啤酒款式,但传统的啤酒或啤酒啤酒也可能受到影响。

鉴定方法美国diastaticus

的识别美国diastaticus可通过检测二氧化碳产生的达勒姆试验原理、含淀粉琼脂平板或含有硫酸铜的琼脂平板(LCSM平板)进行。但同时主要是通过对前体STA1基因进行快速qPCR分析(阳性结果本身并不保证会形成胞外糖化酶,会导致过度衰减)。有几种商用的试剂盒和系统可用于这种DNA检测,当使用平板菌落或稀释的酵母样品时,应该在性能(灵敏度)上非常相似。

假阴性结果带来了一个问题

然而,啤酒厂面临的一个关键问题是对储罐酵母浆中腐败酵母和细菌的分析。酵母浆可重复使用几次后,发酵和污染只有少量美国diastaticus培养酵母中的细胞可能会造成严重的损伤。虽然繁殖酵母菌细胞在生长过程中是活的和有生命的,但在高浓度的酵母菌储存槽中情况不同——在109和1010细胞/毫升和更多。举例来说,从酵母罐中提取的一毫升样本所含的酵母细胞比地球上的人口还多。这些成熟细胞产生的背景水平可能会导致未被检测到美国diastaticus或其他腐败细胞。

为了避免这种假阴性结果,GEN-IAL GmbH开发了一种优化的样品准备套件用于高含酵母细胞的DNA制备(第3节)。不。Q005),并与一家比利时啤酒厂合作进行了测试。可以证明,这种附加酶培养步骤的DNA制备系统减少了细胞碎片的背景,提高了信号质量——而单独稀释样品将减少抑制,但也降低了灵敏度。使用本系统,清晰的检测美国diastaticus甚至可以在以前没有信号的样本中被证明。

GEN-IAL®QuickGEN酵母样品制备离心(第2款)不。: Q005)

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